1-1 ضرورت و اهمیت موضوع…………………………… 3
1- 2بیان مسئله……………………………. 4
1-3 اهداف تحقیق…………………………….. 5
فصل دوم: بررسی متون و مطالعات دیگران در این زمینه
2-1 فیزیولوژی تولید مثل در ماهیان…………………………….. 7
2-2 محور هیپوتالاموس – هیپوفیز – گناد……………………………. 8
2-3- هیپوتالاموس……………………………… 8
2-3-1 – هورمون های هیپوتالاموسی…………………………….. 9
2-4- غده هیپوفیز (Pitiutary gland)……………………………
2-4-1- هورمون گنادوتروپین ( GtH )……………………………
2-4-2 – عوامل مؤثر بر GtH-I و Gth-II……………………………
2-5- دستگاه تولید مثل……………………………. 12
2-5-1 مورفولوژی بیضه……………………………. 14
2-5-2- هیستولوژی بیضه……………………………. 15
2-6 اسپرماتوژنز و اسپرمیوژنز……………………………. 15
6-2- 1- سایر اجزای سلولی…………………………….. 18
2-7- چرخه های فصلی بیضه……………………………. 18
2-8 معرفی گیاه خولنجان (Alpinia officinarum Hance)………………..
2-9. آندروژن ها…………………………… 22
2-10 .چگونگی تلقیح هورمون به بدن ماهی…………………………….. 22
آب مناسب برای مصرف در آکواریوم……………………………. 23
2-11. ماهی های آکواریومی زنده زا…………………………… 24
2-12. معرفی ماهی مولی…………………………….. 26
خصوصیات فیزیکو شیمیایی…………………………… 26
2-13 . طرزتشخیص جنسیت مولی…………………………….. 27
2-14-استفاده از ماهی مولی به عنوان مدل در مطالعات بیولوژیک و توکسیکولوژیک…….. 28
فصل سوم : مواد و روشها
3-1 دستگاه و ابزارهای مورد نیاز……………………………. 32
3-2 مواد مورد نیاز…………………………….32
3-3 روش کار……………………………. 34
3-3-1 آماده سازی ماهیان و آکواریوم ها ……………………………34
3-3-2 تیمار بندی…………………………….. 35
3-3-3 چگونگی آماده سازی دارو……………………………. 35
3-3-4 چگونگی عصاره گیری از ریزوم گیاه خولنجان…………… 36
3-4-1 بیهوش کردن ماهی…………………………….. 36
3-4-2 مراحل تزریق…………………………….. 37
3-4-3 تشریح ماهی…………………………….. 37
3-5 مراحل تهیه مقاطع بافتی…………………………….. 39
3-6- اندازه گیری سطوح استروئیدی…………………………….. 43
2-7- تعیین شاخص گنادوسوماتیک ( GSI)……………………………
3-8 بررسی های آماری…………………………….. 44
فصل چهارم : نتایج( شامل نتایج نمودارها و جداول آماری )
4-1 – بررسی وزن و طول ماهیان…………………………….. 46
4-2 نتایج شاخص گنادوسوماتیک GSI……………………………
4-3 نتایج سطوح استروئیدی…………………………….. 54
4-3-1.. نتایج سطح تستوسترون…………………………….. 54
4-3-2 نتایج سطح کورتیزول……………………………. 56
4-4. نتایج بررسی طول گناد……………………………. 59
4-5- نتایج بافت شناسی بیضه ماهی…………………………….. 61
فصل پنجم : بحث و نتیجه گیری
5-1 . بحث و نتیجه گیری…………………………….. 69
5-1-2 بررسی شاخص GSI……………………………
5-1-3. بررسی نتایج سنجش هورمونی…………………….. 70
5-1-4. بررسی نتایج بافت شناسی بیضه……………….. 72
5-2. نتیجه گیری نهایی…………………………….. 73
پیشنهادت…………………………….. 74
خلاصه انگلیسی…………………………..79
منابع……………………………. 76
چکیده:
در این تحقیق اثرات 17- آلفا متیل تستوسترون و عصاره گیاه خولنجان بر سیستم تولید مثلی و سیستم آدرنال ( هورمون کورتیزول ) در ماهی مولی بالغ نر بررسی شد. بدین منظور ، پس از کلر زدایی آب آکواریوم ها ، 100 قطعه ماهی نر بالغ مولی با میانگین وزنی 3 ±1گرم در آکواریوم رها شد . آداپته کردن ماهی به مدت 48 ساعت انجام شد . سپس فاکتورهای فیزیکوشیمیایی آب مثل دما ، pH، سختی آب و فشار اکسیژن محاسبه شد . آزمایش در 10 گروه انجام شد . ( 2 گروه کنترل و 8 گروه تیمار) هر گروه شامل 10 قطعه ماهی نر و بالغ بود . دوزهای مختلف عصاره خولنجان و 17- آلفا متیل تستوسترون به مقدار 02/0 میلی لیتر در هر نوبت تزریق شد و ماهیان تیمار خولنجان ، عصاره گیاه با دوزهای 10، 20 ، 30 و 50 میلی گرم بر کیلوگرم و ماهیان تیمار 17- آلفا متیل تستوسترون با دوزهای 1 ، 5، 10و 20 میلی گرم بر کیلوگرم دریافت کردند . تزریق بصورت داخل عضله ای در عضله زیرباله پشتی ، بصورت 1 روز در میان و به مدت 20 روز انجام شد . سپس ماهی ها کشته شدند . بافت بیضه آن ها جدا و در فرمالین 10 درصد فیکس شد . آزمایشات بیومتری ماهی ها شامل اندازه گیری طول و وزن انجام شد . سپس مقایسه هیستولوژیکی بیضه تیمارها با گروه های کنترل انجام شد . نتایج نشان داد که شاخص گنادو سوماتیک در دو دوز 30 و 50 میلی گرم از گیاه خولنجان افزایش یافت.
بررسی نتایج حاکی از آن است که عصاره گیاه خولنجان در کلیه تیمارها مانند 17- آلفا متیل تستوسترون باعث افزایش بلوغ اسپرم و بلوغ نهایی ماهی شد.
فصل اول: کلیات
1-1- ضرورت و اهمیت موضوع
تستوسترون هورمونی است که در چند سال گذشته به عنوان دارو جهت درمان هایپوگنادیسم در مردان استفاده می شود . از جمله خواص آب می توان به عدم تأثیر آن بر کبد و بیشتر ارگان های داخلی اشاره کرد ولی با توجه به اثر آن بر پروستات ، در بعضی موارد باعث هایپرپلازی پروستات و افزایش فشار بر مجاری ادراری و در نتیجه کاهش حجم ادرار می شود (1) .
گیاه خولنجان با نام علمی Alpinia officinarum از خانواده Zingiberaceae یا زنجبیل می باشد . از جمله خواص گیاهان این خانواده می توان به اثر افزایش دهنده فعالیت در سیستم تولید مثلی جنس نر اشاره کرد . (2)
این گیاه حاوی فلاونویید هایی است که این فلاونویید ها دارای اثرات متفاوت ازجمله اثرات آنتی اکسیدانی واثرافزایش دهندگی باروری می باشد . (3)
تولید مثل در ماهی ها به وسیله فرایندهای درون زا کنترل می گردد (4) دو استراتژی برای القای تولید مثل در ماهی وجود دارد . اولین استراتژی ایجاد محیط مشابه با آنچه در طبیعت برای تولید مثل لازم است ، فراهم شود . دومین استراتژی تزریق هورمون بوسیله هورمون های طبیعی تولید مثلی یا هورمون های آنالوگ سنتتیک می باشد (5) .
با توجه به اینکه تا کنون اثر گیاه خولنجان بر دستگاه تولید مثل ماهیان مورد بررسی قرار نگرفته است لذا در تحقیق حاضر تأثیر 17- آلفا متیل تستوسترون و عصاره ریزوم گیاه خولنجان در بافت بیضه ماهی مولی بالغ نر مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت.
2-1- بیان مسأله
تستوسترون از جمله هورمون های جنسی است که علاوه بر تأثیر بر سیستم تولید مثلی باعث افزایش توده ی استخوانی و ماهیچه ای و افزایش حساسیت به انسولین می شود . همچنین در مردانی که سطح تستوسترون خونشان پایین است ، در اثر مصرف تستوسترون ، بهبود حالات روحی مشاهده می شود .
بسیاری از مردان مسن علائم افزایش سطح انرژی ، فعالیت جنسی و بهبود خلق را در اثر درمان جایگزین با تستوسترون نشان می دهند .
کارن هربست ، اندوکراینولوژیست ، پیش بینی کرده که 1 نفر از 10 نفر مرد پاسخ خوبی به تستوسترون درمانی نشان می دهند ولی بطور کلی پاسخ افراد به تستوسترون متفاوت است .
از جمله عوارض جانبی تستوسترون می توان به افزایش خوش خیم سایز پروستات ، آپنه تنفسی هنگام خواب ، تشکیل لخته های خونی و نارسایی قلبی اشاره کرد ( 6) در مطالعه ای که توسط Ratnasooria و همکارانش در سال 2005 صورت گرفت مشخص شد که عصاره ی گیاه calcarata Alpinia که هم خانواده ی گیاه خولنجان می باشد ، باعث افزایش رفتارهای جنسی و افزایش باروری در رت های نر می باشد . این گیاه همچنین باعث افزایش سطح تستوسترون در خون موش های مورد آزمایش شد . (2)
ماهی مولی با نام علمی Poecilia latipinna متعلق به رده ی ماهیان زنده زا می باشد . طول این ماهی 5 تا 10 سانتی متر و دمای مناسب برای نگه داری آن 22 تا 26 درجه سانتیگراد می باشد (7)
بافت بیضه این ماهی در این تحقیق مورد بررسی قرار گرفت.
3-1- اهداف تحقیق
هدف از این پژوهش بررسی مقایسه اثرات عصاره خولنجان و 17- آلفا متیل تستوسترون بر شاخص های کیفی اسپرم در ماهی مولی نر بالغ می باشد .
از دیگر اهداف طرح می توان به موارد زیر اشاره کرد :
1- بررسی تأثیر خولنجان بر شاخص گنادوسوماتیک در ماهی مولی
2- بررسی تأثیر خولنجان بر شاخص های کیفی اسپرم در ماهی مولی
[سه شنبه 1399-10-02] [ 11:56:00 ق.ظ ]
|